一氧化氮（NO）介导的半胱氨酸亚硝基化是重要的氧化还原信号修饰，调控心血管、神经、免疫系统大量蛋白功能。SNO 与二硫键、亚磺酸、过硫化等巯基修饰存在广泛 cross-talk。
SNO 由一氧化氮合酶（NOS1-3）产生 NO 后，与半胱氨酸巯基反应生成亚硝基硫醇（SNO）。SNO 是可逆修饰，可被 GSNOR（亚硝基谷胱甘肽还原酶）等酶系统还原回巯基。
用 MMTS 封闭游离巯基 → 抗坏血酸盐将 SNO 还原为巯基 → HPDP-生物素标记新巯基 → 链霉亲和素富集。经典方法，1999 年首次报道，目前仍是主流。
使用 iodoTMT 试剂对还原后的巯基进行同位素标记，配合 TMT 多通道定量，可在 6/10/16 个样本中同时定量 SNO 位点。
使用亚硝基化特异性片段化（CID / ETD）直接鉴定 SNO 残基，避免衍生带来的假阳性。灵敏度较低，需高质量质谱。
SNO 分析最大的挑战是假阳性（人为 SNO 修饰）和假阴性（SNO 降解），需严格质控：
缺血再灌注、心衰、高血压中的 SNO 谱变化。
PD 模型、AD 模型中 α-synuclein、tau 蛋白的 SNO。
药理学 NOS 抑制后全 SNO 谱的下游变化。
NO 供体、S-亚硝基硫醇药物的作用机制研究。
生物素转换法 + iodoTMT 定量是 Aimsmass 推荐的标准流程。
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