棕榈酰化是脂肪酸(C16:0)通过硫酯键连接到半胱氨酸侧链的可逆脂质修饰,调控膜锚定、蛋白-膜相互作用、信号转导与神经传递。是 20+ 种人类酰基转移酶(DHHC-PATs)的核心研究对象。
棕榈酰化是唯一可逆的脂质修饰(其他脂肪酸修饰为不可逆),可被 APT1/2、ABHD17 等去棕榈酰化酶去除。棕榈酰化动力学(on/off 速率)调控许多离子通道(如 PSD-95)的信号转导速度。
用 NEM 封闭游离巯基,羟胺切断硫酯键释放半胱氨酸,新生成的巯基与硫丙基琼脂糖树脂共价结合。简单、稳定、富集效率高(70-90%)。Aimsmass 默认推荐方法。
类似 Acyl-RAC,但用 HPDP-生物素替代硫丙基树脂,富集产物用链霉亲和素珠捕获。可与后续的 LC-MS/MS 直接联用。
使用 17-ODYA(alkyne 标记的棕榈酸类似物)代谢标记细胞 + Click 化学连接生物素探针。可用于动态棕榈酰化脉冲追踪(pulse-chase)。
棕榈酰化的核心生物学特征是"高度动态":
人类有 23 种 DHHC 酰基转移酶,具有不同的亚细胞定位与底物偏好:Aimsmass 提供的 DHHC 家族酶底物谱筛选服务包含:
PSD-95、GluA1 等突触蛋白的棕榈酰化动态与学习记忆。
TCR 信号复合体棕榈酰化与免疫突触组装。
IFITM 蛋白的棕榈酰化与病毒入胞抑制。
H/N-Ras 棕榈酰化循环与肿瘤信号通路。
Acyl-RAC、ABE、Click 化学三种方案可按样本特性选择。
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